厌氧培养袋培养的实验步骤

　　厌氧培养袋可在小或中空间制作厌氧环境，操作方便，无需任何复杂的专用设备，可在所有实验室使用，非常适合实验室中小型试验操作。

 

　　厌氧培养袋可用于培养厌氧菌，专用厌氧菌需要在严格的无氧气体环境中生长，氧气会对细菌产生毒性作用。一些厌氧菌在含有5％－10％二氧化碳的气体环境中可以耐受低浓度氧气。

 

　　常见的专用厌氧菌有梭菌，如产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌、困难梭菌等，双歧杆菌，如婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌等，拟杆菌、梭菌、厌氧消化链球菌等。

 

　　培养基要与厌氧环境气体循环，如试管、锥形瓶等容器，以确保塞的透气性；培养平板容器时，要确保平板容器具有良好的透气性，不能用密封膜密封缠绕。

 

　　实验步骤：

 

　　1、将已接种细菌的血平板以及产气管，指示剂，催化剂放入塑料袋内，排出袋中气体，卷叠好袋口，并用大铁夹将塑料袋夹紧密，以防漏气。

 

　　2、折断产气管，管内发生反应，产生CO2和H2.CO2供细菌生长需要，能促使许多厌氧菌生长，钯催化剂可催化H2和袋内的O2生成H2O，从而耗尽袋内的O2，待其化学作用完成后，袋内即处于无氧状态。（由此造成厌氧环境约需半小时）

 

　　3、于产气管弄破半小时后，将装有已还原成无色的美蓝指示剂安瓿弄破，若溶液变蓝色，表示美蓝被氧化，袋内仍有氧气存在，如指示剂不变蓝色，即表示袋内已处于无氧状态。

 

　　4、将厌氧袋置37℃温箱孵育，48小时后观察结果。