无菌透析袋是怎样使用的呢？

　　透析已成为生物化学实验室zui简便zui常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。那无菌透析袋是怎样使用的呢？

　　1 透析的原理

　　透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

　　透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

　　2 无菌透析袋的材质与规格

　　透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的zui多的还是用纤维素（再生纤维素 RC、纤维素酯CE、PVDF等）制成的透析膜，目前常用的是美国光谱医学公司（spectrum）和美国联合碳化物公司（union carbide）生产的各种尺寸的透析管。截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量，缩写为MwCO）大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类，单位为道尔顿（D）。截留分子量越大也就是说透过性越大，一般而言，透析袋截留分子量越小价格越贵，因为截留的分子越小要求透析袋越密，价格越贵。商品透析袋制成管状，其扁平宽度为8mm-77mm不等。

　　半透膜制成的透析袋作为工具，存在透析时间长、样品回收率不高、无法处理微量样品的难题。目前已有专为10到100ul的微量样品透析而设计的透析工具。把样品加在平底的透析管（类似小量提质粒的离心纯化柱，可以插入1.5ml的离心管中，管底是半透膜）中，再插入特制的浮板（浮漂）中，置于缓冲液面10min即完成透析。实验表明，100ul pH2.8的IgG洗脱液在1L pH9.4的缓冲液中只需不到10min即可平衡到pH9.4。如果在装缓冲液的烧杯底加磁力棒搅拌则更能加速透析速度。这种方法有较高的回收率，能够节约珍贵的样品，并能节约时间，特别适合摸条件的预实验。

　　透析袋的标识：

　　27mm（MD34）透析袋（MW：3500）

　　27mm是指透析袋干燥时的直径。

　　MD34mm是指透析袋干燥时压平的宽度。

　　MW：3500是指无菌透析袋的截留分子量。